lunes, 18 de mayo de 2009

Bitacora de Equipos de Laboratorio CIBE-ESPOL., Bitacora de mantenimiento preventivo y Bitacora de mantenimiento correctivo

Bitacora de mantenimiento preventivo





























Bitacora de mantenimiento correctivo
























Bitacora de Equipos de Laboratorio CIBE-ESPOL

miércoles, 13 de mayo de 2009

Tarea #3 (3er parcial Tincion)




Tincion
Las tinciones se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no ha muerto el proceso termina de hacerlo. El método, por consiguiente, es bastante drástico y puede producir artificios.
Las tinciones mas frecuente son sales. Las tinciones básicas consisten en un catión coloreado unido a un anión incoloro, mientras las ácidas constituyen exactamente lo contrario, unido a dos cationes. Las células bacterianas son abundantes en ácidos nucleicos, los cuales portan cargas negativas en formas de fosfatos. Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterias, y por tanto, pueden utilizarse para teñir al fondo con un color de contraste.
Las tinciones básicas tiñen uniformemente en las células bacterianas, a menos que antes de destruyan el ARN del citoplasma. También se pueden usar técnicas de tinción especiales para flagelos, membranas celulares, paredes celulares, gránulos, nucleótidos y esporas.


Clasificación de las tinciones:
Las Bacterias pueden diferenciarse en relación a la estructura de su pared celular mediante una tinción diferencial denominada Tinción de Gram . Se puede discriminar entre dos grandes grupós de bacterias: Gram positivas (se tiñen de violeta) y Gram negativas (se tiñen rosadas). Hay otro grupo de bacterias denominadas bacilos ácido alcohol resistente que son diferenciados utilizando la coloración de Ziehl Nielsen, éstos son resistentes a la decoloración ácida permaneciendo teñidos de fucsia.
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, para la identificación de macroorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis. Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR. Las mico bacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia.
La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.
En una tinción directa el colorante interacciona directamente con el sustrato. En una tinción indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia química denominada "mordiente" con el sustrato la cual permite la posterior interacción del colorante. Usualmente los mordientes son sales, hidróxidos o alumbres de metales bivalentes o trivalentes.


• Tinciones simples:
O tinción negativa: se usa un colorante ácido, nigrosina o tinta china, que no entra en la célula de modo que estas no se observan teñidas, lo que se ve de color es el fondo.
* Frotis.
* Secado al aire
*Colorante.
*Visionado a 100X
O tinción básica: se usa azul de metileno que si tiñe a las células.
*Frotis.
* Fijación.
* Colorante.
* Lavado con agua destilada.
* Secado al aire.
*Visionado a 100X.

• Tinciones diferenciales:
O tinción Gram: se basa en las diferencias entre las paredes de las Gram + y las Gram - , el primer colorante tiñe todas las células, en las G+ entra y con la acción del lugol formara una molécula muy grande que no sale de la célula, pero el disolvente, etanol, disolverá la capa d lipopolisacaridos de las Gram negativas donde esta el 1º colorante, ya que no pudo atravesar esta barrera, de modo que al añadir el 2º será este el único que les de color.
* Extensión.
* Fijación.
* Colorante básico, cristal violeta, entra en las células.
* Lavado con agua destilada.
* Mordiente, lugol: el colorante básico ya no puede salir de G+.
* Lavado con etanol que disuelve la capa de lipopolisacaridos de G- donde esta el 1º colorante.
*Colorante de contraste básico, safranina o rojo metilo . que tiñe a las G-.


a) Azul de metileno (Tinción positiva). Permite teñir el interior celular. Tiñe
Microorganismos procarióticos (vivos o muertos). Los eucarióticos sólo se tiñen si están
Muertos. Algunas estructuras, como los corpúsculos meta cromáticos, se tiñen más
Intensamente con este colorante que el resto de la célula.
El azul de metileno se usa como tintura para teñir ciertas partes del cuerpo antes o durante la cirugía. Su uso es principalmente como antiséptico y cicatrizado interno. También se utiliza como colorante en las tinciones para la observación en el microscopio.

Tarea #2 3er parcial (medio de cultivo)

Medio de cultivo

Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes. El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licua completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea.


Siembra
Sembrar es introducir artificialmente una porción de muestra en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano. Luego de sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento. La siembra puede realizarse en medio líquido, sólido o semisólido, utilizando punta, ansa, hisopo o pipeta estéril. Cultivo en medio líquido Se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o película, o por sedimento. Cultivo en medio sólido Puede ser en tubos o placas.
a) Tubos con agar inclinado. Para sembrarlos, se mueve el ansa o la punta suavemente sobre la superficie del agar con un movimiento en zigzag desde el fondo hasta la parte superior, cuidando de no dañar el agar.
b) Tubos sin inclinar. Se siembran introduciendo una punta en el centro del agar. También se llama siembra por picadura.
c) Siembra en placas. Puede ser en superficie o incorporada.


CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVOMEDIOS ENRIQUECIDOS

Algunos microorganismos no son capaces de desarrollarse en medios de cultivo normales. Para cultivarlos necesitamos añadir sustancias altamente nutritivas como sangre, suero, extractos de tejidos animales.


MEDIOS SELECTIVOS Contienen uno o varios compuestos que inhiben el crecimiento de un determinado tipo de microorganismos y no afectan a otros tipos. Otra manera es modificar la fuente de carbono; si sustituimos la glucosa por maltosa, seleccionamos aquellos microorganismos capaces de digerirla.

MEDIOS DIFERENCIALES Contienen distintos compuestos químicos o indicadores sobre los que determinados microorganismos adquiere coloraciones específicas o reaccionan de una manera determinada.

MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES Se usa para detectar E. Coli y Salmonella. E. Coli es tolerante a la lactosa. Al digerirla, libera ácidos, por lo que se crea un medio ácido y el indicador se pone rojo. Salmonella no tolera la lactosa, por lo que no formará ácidos y formará colonias incoloras.

CULTIVOS PUROS: MEDIOS DE OBTENCIÓN Los microorganismos en estado natural crecen de forma heterogénea o mixta. Cuando queremos estudiar un microorganismo dado, debemos aislarlo. Un cultivo puro es aquel que contiene un solo tipo de microorganismo.

Tarea #1 3er parcial (bacterias)

Los paramecios
Los paramecios (género Paramecium) son protozoos ciliados con forma de suela de zapato o elipsoide, habituales en aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. Son probablemente los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por la Ciencia. El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas 0'05 milímetros.
Carecen de flagelos, pero los cilios son muy abundantes y recubren toda su superficie. A ellos les corresponde proporcionar movimiento al organismo. La membrana externa absorbe y expulsa regularmente el agua del exterior con el fin de controlar la osmorregulación, proceso dirigido por dos vacuolas contráctiles. En su anatomía destaca el citostoma, una especie de in ción situada a todo lo largo del paramecio de la que éste se sirve para capturar el alimento, conformado por partículas orgánicas flotantes y microorganismos menores. El citostoma conduce a una citofaringe antes de que el alimento pase al interior de este protozoo. Otros orgánulos de fácil observación son el núcleo eucariota, situado junto a un "micronúcleo" en el centro del paramecio, y las vacuolas digestivas, que digieren constantemente el alimento capturado. Los desechos se expulsan por exocitosis, mediante vacuolas de secreción que se originan a partir de las digestivas. Como muchos otros microorganismos, los paramecios se reproducen a por fisión binaria.
Características:
Se trata de un protozoo minúsculo con forma de zapatilla que abunda en lagos, estanques y charcos. Se mueve constantemente, para lo cual se sirve de innumerables hebras microscópicos llamados cilios, con los que golpea el agua a modo de remos. Los paramecios se alimentan de bacterias y otros organismos microscópicos. Para atrapar su alimento, utilizan una boca en forma de ranura.




















Escherichia coli
Las bacterias del género E. coli son Gram-negativas, tienen forma de barra y pertenecen a la familia Enterobacteriaceae. Esta bacteria es un habitante común de los intestinos de todos los animales, incluyendo el de los humanos. Cuando se usan métodos de cultivos aeróbicos, esta bacteria es la especie nte encontrada en las heces. Normalmente cumple una función importante en el cuerpo, suprimiendo el crecimiento de especies dañinas de bacterias así como también sintetizando cantidades apreciables de vitaminas. Son pocas las cepas de E. coli capaces de causar enfermedades a los humanos a través de diferentes mecanismos. Entre ellas están las cepas enteroinvasivas (EIEC) responsables de una forma de la disentería bacilar. No obstante, es desconocido aún el tipo de alimentos que pueden hospedar a estas bacterias patogénicas.

























Salmonella typhi
La S. typhi es una bacteria anaeróbica facultativa, que puede en ocasiones sobrevivir en bajas condiciones de oxígeno. Pertenece al serotipo 9,12, en base a los epítopes de la tivelosa, el azúcar repetida en su antígeno O. El antígeno flagelar “d“ es el más preponderante, aunque algunas cepas de Indonesia poseen otro antígeno denominado “z”; lo que significa que expresan un flagelo muy diferente en secuencia de aminoácidos al encontrado en las cepas de otras regiones del mundo. Además de los antígenos O y H, tiene en su exterior una cápsula de polisacáridos denominada Vi (por antígeno de “virulencia”).
Estos bacilos no producen esporas. La mayoría de las cepas son móviles debido a que poseen flagelos peritricos, que rodean a la célula. Interesantemente, existen cepas no móviles en Indonesia, en donde la incidencia de la fiebre tifoidea es más alta. La S. typhi produce ácido a partir de glucosa, maltosa y sorbitol, sin la producción de gas; pero no fermenta la lactosa, sacarosa, la ramnosa y otros azúcares. Produce nitrito a partir de nitrato y también produce ácido sulfhídrico. Su temperatura óptima de crecimiento es de 37oC.
Está presente muy frecuentemente en los animales, especialmente en las aves y los porcinos. Entre las fuentes ambientales de este organismo se incluyen el agua, el suelo, los insectos, las superficies de las fábricas, las superficies de las cocinas, las heces fecales de los animales, las carnes crudas, el pollo crudo, los productos marinos crudos, entre otros.





















Proteus
El Síndrome de Proteus causa un crecimiento anormal de la piel, huesos, músculos, tejido adiposo, y vasos sanguíneos y linfáticos. Es una enfermedad progresiva, los niños suelen nacer sin ninguna deformidad evidente. Conforme crecen aparecen los tumores y el crecimiento de la piel y de los huesos.
Proteus es un género de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario.[1] Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razón de tener una β galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron). Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles.[2] Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa.[3] Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol.






















Brucella Abortus
B. abortus es una bacteria Gram negativa con un lipopolisacárido (LPS) fuertemente inmunodominante, el que junto con la capacidad de sobrevivir en el interior de células fagocíticas constituyen sus principales factores de virulencia. La infección en humanos conduce a una enfermedad con tendencia a la cronicidad, con fiebre y malestar recurrentes que deterioran su calidad de vida y que además puede presentar complicaciones como artritis, meningitis, entre otras.
En el ganado bovino la bacteria se ubica en la placenta y órganos reproductores por su afinidad por el eritritol. La respuesta inmune frente a B. abortus, patógeno intracelular facultativo, depende principalmente de la activación de la inmunidad mediada por células, con la participación de células T CD4+ de tipo Th1, que secretan interferón gama (INF-γ), citoquina que estimula tanto la actividad bactericida de macrófagos como la actividad citotóxica de los linfocitos T CD8+. Estos últimos son capaces entonces de destruir células infectadas con Brucella.

viernes, 8 de mayo de 2009

INVESTIGACION DE PIE DE REY

C.B.T.i.s 155


Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Investigación:

Pie de rey






Investigación del Pie de rey
Calibre
El calibre, también denominado cartabón de corredera, pie de rey, pie de metro, pie a coliza o Vernier, es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, desde centímetros hasta fracciones de milímetros (1/10 de milímetro, 1/20 de milímetro, 1/50 de milímetro). En la escala de las pulgadas tiene divisiones equivalentes a 1/16 de pulgada, y, en su nonio, de 1/128 de pulgadas.
Es un instrumento sumamente delicado y debe maniobrarse con habilidad, cuidado y delicadeza, con precaución de no rayarlo ni doblarlo (en especial, la coliza de profundidad).
Historia
El primer instrumento de características similares fue encontrado en un naufragio en la isla de Giglio, cerca de la costa italiana, datado en el siglo VI a.C. Aunque considerado raro, fue usado por griegos y romanos. Se atribuye al cosmógrafo y matemático portugués Pedro Núñez (1492-1577) —que inventó el nonio o nonius—, el origen del pie de rey. También se ha llamado pie de rey al vernier, porque hay quien atribuye su invento al geómetra Pierre Vernier (1580-1637), aunque lo que verdaderamente inventó fue la regla de cálculo vernier, que ha sido confundida con el nonio inventado por Pedro Núñez. En castellano, se utiliza con frecuencia la voz nonio para definir esa escala.
El calibre moderno con nonio y lectura de milésimas de pulgada, fue inventado por el americano Joseph R. Brown en 1851. Fue el primer instrumento práctico para efectuar mediciones de precisión que pudo ser vendido a un precio asequible.
Componentes
Componentes del pie de rey.
Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas.
Mordazas para medidas externas.
Mordazas para medidas internas.
Coliza para medida de profundidades.
Escala con divisiones en centímetros y milímetros.
Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada.
Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido.
Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido.
Botón de deslizamiento y freno.

ESCRITO DE CAMARA DE NEUBAUER

Cámara de Neubauer




Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )



La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente.. Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..
El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:

Mujeres:
3.9-5.6 millones/µl
Hombres:
4.5-6.5 millones/µl

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.
El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. Controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.
En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares. Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3mm, con una separación entre dos líneas consecutivas de 0.25mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milímetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.
Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será:
concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)

En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases

Existen numerosos os de cámaras de contaje celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.


Para determinar la viabilidad celular se emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión, determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso de la tinción con ioduro de propicio. En la red dispones de descripciones detalladas sobre como utilizar un hemocitómetro, como la propuesta por P.J. Hansen, o la detallada descripción que aporta Beckton-Dickinson, y los problemas de cálculo de parámetros celulares que plantea empleando datos obtenidos a partir de un hemocitómetro, y otros protocolos para el contaje de células

1. Se aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.
2. Se deshecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el enrasado.
3. A continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).
4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas por corresponder al líquido que estaba en el capilar.
5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuenta glóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo de la misma.
6. Una vez preparada la cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter sucesivamente.
7. El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número de cuadrados contados.
Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):
Volumen de un cuadrado grande (1/10mm de profundidad):

Si contamos "a" glóbulos rojos en "n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será a/n.
Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:
siendo X el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre diluida. Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200, habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).

Se utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por unidad de volumen de un líquido.
La cámara está constituida por una placa base de vidrio especial parecido a un porta, su parte central se encuentra separada de los extremos por unas ranuras. En ella se encuentran las cuadrículas de recuento.
La fórmula de contaje es: partículas/mm3= partículas contadas.
Clases de cámaras:
- Neubauer improved: Es el más utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)
- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.
- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.
- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido sinovial…)

EJERCICIOS EN CLASE

C.B.T.i.s 155


Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Ejercicios en clase



Fecha:

29/03/09




Realizar los siguientes problemas correspondientes a medio de cultivo.

1-Anotar el nombre del medio de cultivo que se nos facilita, con todos los datos visibles en su etiqueta.
2-Leer cuidadosamente las indicaciones que contiene el bote de medio de cultivo.
3-Rehidratar el contenido en gramos para 1000ml, del cual deberán ocupar un porcentaje para rehidratar en 250 ml, en 175 ml y en 138 ml.
4-Las operaciones deben de ser con números básicos, como suma, resta, multiplicación y división para poder ejecutar regla de 3.



Problema 1.
Formula= gramos por litro: 31.02gr.
Ocupar 250 ml

1000 ml = 31.02gr
250 ml = x

X= (250 ml) (31.02gr) / 1000 ml

X=7.755 gr.


Problema 2.
Ocupar 175 ml.


1000 ml = 31.02gr
175 ml = x

X= (175 ml) (31.02) / 1000ml

X=5.42 gr.



Problema 3
Ocupar 138 ml

1000 ml = 31.02gr
138 ml = x

X= (138 ml) (31.02gr) / 1000ml
X= 4.28 gr.

PRACTICA 2

C.B.T.i.s 155



Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Practica:

2

Fecha:

30/03/09




Objetivo.

El objetivo de esta práctica es saber como utilizar la balanza al pesar instrumentos de laboratorio de cristalería.

Introducción.

En esta práctica se peso los instrumentos de cristalería como pipetas, probetas, etc., en una balanza común.





Desarrollo o Marco Teórico



Hora. Actividad.
8:00 a 8:10 Nos pusimos el equipo de bioseguridad.
8:10 a 8:30 El profesor nos dio las instrucciones para realizar la práctica.
8:30 a 9:10 Se tomo el peso de cada uno de los instrumentos.
9:10 a 9:50 Empezamos un ejercicio con una caja de petri y sal como un tipo de medio de cultivo, buscamos cuantos medios de cultivos se pueden llevar a cabo con lo que teníamos.
9:50 a 10:00 Guardamos los instrumentos.

Resultados de los instrumentos.


Vidrio de reloj = 25gr

Vaso de precipitado de 50 ml = 27.6gr

Caja de petri = 87.9gr

Vaso de precipitado de 500 ml = 117.2gr

Vidrio escavado = 31.1gr

Probeta graduada de 100 ml = 98.4gr

Pipeta de 5 ml = 22.9gr

Pipeta de rally = 4.8gr

Pipeta de 10 ml = 25.7gr
Pipeta Pasteur = 3.7gr

Espátula = 51.6gr

Pipeta de 100 ml = 3.3gr

Tubo de ensaye = 9gr

Manguerilla = 3.5gr

Cristalizador = 47.9gr

Sal = 31.1gr

Cristalizador con sal = 79.1gr

Vidrio de reloj con 1 gota de agua = 25.1gr

Vidrio de reloj con 1 ml de agua = 25.2gr





Ejercicio de medio cultivo.

Tenemos 31.1gr de solución para medio de cultivo. Se necesitan 52gr para un litro.
¿Para cuantos ml nos alcanza y cuantos medios de cultivo se pueden lograr?

1000 ml = 52gr
X = 31.1gr

X= (31.1gr) (100 ml) / 52gr

X=598.07 ml

Medios de cultivo posibles= 598.07 / 25.

Medios de cultivo=24.



Conclusiones.

Con esta práctica aprendimos a manejar la balanza para medir cada uno de los instrumentos ya que es muy necesario.

INVESTIGACION

C.B.T.i.s 155




Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Tarea:

Trabajó de investigación.

Fecha:

24/03/09






Cámara de Neubauer





Es un instrumento utilizado en cultivo celular para relizar conteo de celulas en un medio de cultivo liquido. Consta de 2 placas de vidrio, entre las cuales se pede alojar un volumen conocido de liquido. Una de las placas posee una grilla de dimensiones conocidas y que es visible al microscopio optico.

1. El nombre de las celulas vegetales y sus conceptos.


CELULAS DE LOS TOMATES.
Grandes células esféricas u ovoides, en cuyo citoplasma puede verse granulaciones naranjadas que son los cromoplastos.
También puede verse grandes vacuolas incoloras en células menos alteradas en el núcleo.

CELULAS DE LAS CEBOLLAS.
Pueden ser vacuolas o bien burbujas de aire. Células de catatilo de cebolla.

SEROLOGIA

C.B.T.i.s 155


Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Tarea:

Serologia










Pruebas serológicas o de laboratorio


Las pruebas biológicas o invitro (en laboratorio, no en el animal) son formas de evaluación relativas, que detectan concentraciones comparativas de ciertas clases de inmunológia (Ig) que podrían estar presentes en algunas alergias. El nivel de desarrollo y avances en veterinaria no es aun comparable al alcanzado en medicina humana, por lo que su efectividad y sensibilidad están aun en estudio. En muchos países, esta tecnología ha avanzado mucho, y ala pruebas son mas depuradas y sensibles, pero en otras regiones las pruebas disponibles resultan anticuadas, y por la febrilidad puede ser discutible, Aun así puede resultar efectivas en la determinación de causas de alergia, pero teniendo en cuenta sus limitaciones, a fin de sacarles provecho frente a su alto costo.

Las pruebas deberían ser evaluadas por un alergista que puede interpretar la relación de los hallazgos del análisis frente ala historia del animal teniendo en cuenta su medio ambiente. Debería solicitarse la medición de alergenos individuales y evitar el uso de grupos alergenos que pueden dar resultado desconcertantes. Evitar las pruebas que miden alergenos alimentarios o de contacto ya que su efectividad no esta comprobada y puede causar desazón en el propietario. Para este tipo de alergenos existen otras pruebas mucho más afectivas.

En definitiva, ciertas pruebas biológicas pueden servir solamente para que el propietario tome conciencia de que su animal es alérgico, lo cual ya se sospechaba antes. Los animales que no presentan alergias también pueden dar resultado positivo en estas pruebas, lo que complica la evaluación.

PRACTICA 1

C.B.T.i.s 155


Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Practica:

1

Fecha:

24/03/09



Objetivo.

El objetivo de esta práctica fue saber como enfocar los objetivos claramente.

Introducción.
En esta practica utilizamos el microscopio conocimos la cámara de Neubauer, entre otros, enfocamos la cámara de Neubauer, también un pedaso de cebolla, tomate y lechuga.




Índice.

• Portada……………………………………………..1
• Objetivo e Introducción…………………………...2
• Índice…………………………………………….....3
• Desarrollo o Marco Teórico………………………4
• Conclusión…………………………………………5




Desarrollo o Marco Teórico





Hora Actividad realizada
8:00 a 8:15 Nos pusimos el equipo de bioseguridad.
8:15 a 8:30 Nos dieron indicaciones y se preparo el equipo para la actividad, microscopio, cámara de Neubauer, porta y cubre objetos.
8:30 a 9:00 Empezamos a realizar la actividad de enfoque de la cámara de Neubauer por turnos.
9:00 a 9:45 Enfocamos nuevamente pero esta vez cebolla, tomata y lechuga.
9:45 a 10:00 Se recogió y limpio el equipo que se utilizo y se guardo.








Observación de enfoque de Neubauer.
Se muestran líneas en forma cruzadas en forma de cuadros pequeños y grandes.


Observación de enfoque de cebolla.
Se muestra en forma de esferas unidas chicas y grandes.

Observación de enfoque de tomate.
Se muestra en forma de una tela muy delgada con pocos óvalos un poco obscuros y algunas como venas.

Observación de enfoque de lechuga.
Se muestra en forma de bolitas unidas o al parecer así se ven con este enfoque.





Conclusiones.

Esta actividad nos sirvió mucho para poder aprender a enfocar objetos en el microscopio con mayor claridad y rapidez.

MOLECULAS INORGANICAS

C.B.T.i.s 155





Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Tarea:

Moléculas inorgánicas








Moléculas inorgánicas.
Se denomina compuesto o molécula a todos aquellos compuestos que están formados por distintos elementos, pero en los que su componente principal no siempre es el carbono, siendo el agua el más abundante. En los componentes inorgánicos se podría decir que participa casi la totalidad de elementos conocidos.
Los compuestos inorgánicos existen en menor medida que los orgánicos.
Algunos de los compuestos inorgánicos más comunes que existen en el cuerpo humano son:

-
Hidrato de sodio
-Cu
-Mn.
-Hidróxido sodico.
-Mg
-Zn
-Fe
-P
-Na
-K
-Cl
-Ca
-CoHO
-Amoniaco.
-Jugos gástricos

-Ácidos.


EL AGUA:
Consiste en un átomo de oxigeno y dos de hidrogeno unidos. El agua es un disolvente (liquido en el cual se disocian los solutos), que forman soluciones acuosas en el organismo. Participa en las reacciones químicas:
Síntesis por deshidratación.
Reacción química en el cual se elimina el agua de moléculas pequeñas para poder unirlas y formar una molécula mas grande.



Hidrólisis.
Reacción química en el cual se añade agua a las subunidades de una molécula grande para romperla en moléculas de menor tamaño.
• las reacciones químicas siempre implican una transferencia de energía, como cuando se utiliza energía para sintetizar las moléculas de AYP
• las ecuaciones químicas nos muestran como los reactivos interaccionan para formar productos; las flechas separan los reactivos de los productos.


ACIDOS, BASES Y SALES:
Las moléculas de agua se disocian para generar el mismo número de H+ (hidrogeniones) y OH-(iones hidroxilo)
Ácidos.
Sustancias que desplaza a el equilibrio H+/OH- a favor del primero; opuesto a base.
Base.
Sustancia que desplaza el equilibrio H+/OH- a favor del segundo; denominada también álcali; opuesto al acido.
pH.
Expresión numérica de la concentración relativa de hidrogeniones en una solución acuosa.
El pH 7 se considera neutro
El pH superior a 7 se denomina básico; el Ph inferior a 7 es acido
1. la neutralización sucede cuando se mezclan ácidos y bases para formar sales.
2. los tampones son sistemas químicos que absorben el exceso de acido y bases y mantienen en este modo un pH relativamente estable.

jueves, 7 de mayo de 2009

PRACTICA 3

C.B.T.i.s 155



Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Practica:

3



Objetivo.

El objetivo de esta práctica es aprender a pipetear la medida correcta de líquido.

Introducción.

En esta práctica utilizamos diferentes pipetas como la Pasteur, automática, de 1ml, de 10ml entre otras y pipetiamos con todas para que la medida fuera correcta.






Índice

• Portada…………………………………………………....1
• Objetivo e Introducción………………………………….2
• Índice……………………………………………………...3
• Desarrollo o Marco Teórico……………………………..4
• Conclusión………………………………………………..5






Desarrollo o Marco Teórico



Hora. Actividad.
10:35 a 10:45 Nos pusimos el equipo de bioseguridad.
10:45 a 10:55 Nos estregaron el quipo de laboratorio.
10:55 a 11:20 Pipetiamos 10ml del matraz.
11:20 a 11:40 Pipetiamos 5ml y luego hicimos la bitácora.
11:40 a 11:50 El profesor nos dijo que haríamos el viernes y nos quitamos el equipo de bioseguridad.




Se utilizo cada una de las pipetas para pipetear agua y ponerla en las probetas comparando el volumen absorbido entre estas. También se utilizo la técnica de puntear con la pipeta Pasteur y la pipeta automática. Las pipetas utilizadas fueron:

1 Pipeta volumétrica de 10 ml.

1 Pipeta volumétrica de 5 ml.

1 Pipeta volumétrica de 100 ml.

1 matraz Erlenmeyer.

1 Probeta graduada.

1 Pipeta automática con capacidad de 100 ul.

1 Vidrio de reloj.

1 Pipeta Pasteur.


Conclusión.
En esta práctica aprendimos que no es tan sencillo pipetear y a utilizar la pipeta automática y también a puntear, se necesita práctica para llevar acabo esto.

Investigacion de proteus, brucella y salmonela

C.B.T.i.s 155



Nombre:

José Alberto Huitron Barajas

Profesor:

Doc. Víctor Manuel Alfaro L.

Grupo:

2LM

Investigación de proteus, brucella y salmonela.





Investigación de proteus, brucella y salmonela

Investigación de las clasificación de las bacterias
Salmonella
Crece con facilidad en agar sangre formando colonias de 2 a 3 milímetros en el laboratorio clínico de microscopio ..se aísla con medios selectivos selenito hektoen ss o xld para inhibir el crecimiento de otras bacterias patógenas y de la flora intestinal saprofila. Tienen lo siguientes antigenos
Somático o del li polisacárido en la pared celular tempo estables y es la base de la clasificacion en subgrupos
Flagelar H de la proteína flagelina termolábil es la base de la clasificación de especies.
Envoltura VI termolábil responsables de la virulencia de varias especies patógenas
La especie S. enterica tiene seis subespecies (a veces presentadas como subgrupos bajo numeración romana):
I Enterica
II Salamae
III Arizonae
III Diarizonae
IV Houtenae
V S. ori, ya incluida en una especie distinta
VI indica
Cada subespecie a su vez, está conformada por diversos serotipos, habiéndose identificado hasta la fecha más de 2500. Una de ellas es S. enterica subsp. Esta clasificación implica una terminología de uso poco práctico en la clínica bacteriológica, por lo tanto, en términos médicos, la nomenclatura es diferente y simplificada, pues se consideran los nombres de los serotipos (serovaridades) de Salmonella como si fuesen nombres de especies. Por ejemplo, "Salmonella entericaentérica serotipo Typhimurium", se refiere como "Salmonella typhimurium" subgrupo
ESPECIES : -s . ril -s. enterica -s. enteridis -s. myanza -s. paratyphi -s. tvphi -s. virginia -s. typhimoriom clasificacion cientifica : reino--bacterial filo--proteobacterial clase--gamma proteobacterea orden--entreobacteriales familia--entreobacteriales medida--(entres 0,5 y sum)
BRUCELA ABORTUS
La brucela abortus es una bacteria tambien llamada fiebre malta o fiebre ondulante es una enfermedad que ataca causando la brucelosis humana-
SE CLASIFICAN EN :
-Brucella melitensis -Brucella suis -Brucella abortus -Brucella canis
-Brucella neotomae -Brucella onis
SINTOMAS:
-Fiebre ondulante -fiebre melitensis -fiebre de malta -fiebre de traum -fiebre de chipre -fiebre de bang
PROTEUS :
El Síndrome de Proteus es una enfermedad congénita que causa un crecimiento excesivo de la piel y un desarrollo anormal de los huesos, normalmente acompañados de tumores en más de la mitad del cuerpo. Proteus es un genero de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario.[1]Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles.[2][3] Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol.
CLASIFICACION : Dominio--bacterial filo--proteobacteria clase--gama proteobactereales orden--entrebacteriales familia--entereobacriales genero--proteus
ESPECIES:
-Proteus mirabios -proteus morgani -proteus peneril -proteus rettgeri -proteus volgarts.

CUESTIONARIO DE PIE DE REY

Cuestionario: 1 Segunda unidad.
1.- Es un instrumento para medir dimensiones de objetos relativamente pequeños, Se atribuye al cosmógrafo y matemático portugués que se llama: El pie de rey a Pedro Núñez.
2.- En qué año se le atribuye el pie de rey al cosmógrafo y matemático portugués. 1851

3.- También se ha llamado pie de rey al: Vernier o nonio.
4.- En que año se le atribuye el pie de rey al geómetra pedro Vernier.
1854.
5.- ¿Qué otro nombre recibe el origen del pie de rey?
Nonio o nonius.
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R: Nombre: _Jose Alberto Huitron Barjas.

En los recuadros siguientes ponga el número y nombre correspondiente de la figura de medición
1 Mordazas para medidas externas.
2 Mordazas para medidas internas.
3 Coliza para medidas de profundidad.
4 Escala con divisiones en centímetros y milímetros.
5 Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgadas.
6 Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros.
7 Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada.
8 Boton de deslizamiento.


Descripción del Pie de Rey o Vernier. 121 palabras utilizaras para su descripción. Consta de una "regla" con una escuadra en un extremo, sobre la cual se desliza otra destinada a indicar la medida en una escala. Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50 de milímetro utilizando el nonio. Mediante piezas especiales en la parte superior y en su extremo, permite medir dimensiones internas y profundidades. Posee dos escalas: la inferior milimétrica y la superior en pulgadas. Mordazas para medidas externas. Mordazas para medidas internas. Coliza para medida de profundidades. Escala con divisiones en centímetros y milímetros. Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada. Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido. Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido. Botón de deslizamiento y freno.